樣品RNA的制備
更新時間：2025-04-09 點擊次數(shù)：79
黃頭病毒(Yellow Head Virus,YHV)是一種RNA病毒，黃頭病是對蝦的主要病害之一，病毒感染的靶器官為蝦的鰓、觸角腺、造血組織、淋巴器官等。病蝦發(fā)病初期攝食量增加，然后突然停止吃食，在2~4天內(nèi)會出現(xiàn)臨床現(xiàn)象并死亡。許多瀕臨死亡的蝦聚集在池塘角落的水面附近，其頭胸甲因里面的干胰腺發(fā)黃而變成黃色，對蝦體色發(fā)白，鰓棕色或白色，瀕臨死亡的蝦其外胚層和中胚層發(fā)源的器官會出現(xiàn)全身性的壞死，已納入世界衛(wèi)生組織規(guī)定之檢疫傳染病之一，因此快速準確鑒定對該病的預防和檢疫有著重要作用。本產(chǎn)品基于PCR原理開發(fā)。它具有下列特點：
1.一站式，用于不需要單獨準備每種成分，包括引物和對照。
2.根據(jù)黃頭病毒的保守基因序列設(shè)計的引物，具有良好的特異性。
3.基于染料法qRT-PCR檢測，靈敏度比常規(guī)RT-PCR高10-100倍，可以達到至少1000拷貝/反應。
4.使用一管式qRT-PCR技術(shù)，RT和PCR兩步在一個試管內(nèi)完成，不需要中間轉(zhuǎn)移樣品，降低了操作誤差和可能的污染。
5.本產(chǎn)品足夠50次30μL體系的RT-PCR，只能用于科研，不能用于臨床。
樣品RNA的制備：
如果有N個樣品，必須設(shè)置N+2個提取，多出的一個是PC（樣品制備陽性對照），一個是NC（樣品制備陰性對照）?？梢杂?0μL上步制備的陽性對照梯度稀釋液中的第4號（濃度為1×10E4拷貝/μL，10μL相當于1萬拷貝）再加上一定量的水作為制備的陽性對照（加水后其總體積跟樣品一樣，樣品體積多少取決于所用試劑盒的要求）?？梢杂盟鳛橹苽涞年幮詫φ铡?/div>
用自選方法純化N+2個樣品的RNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒RNA提取試劑盒兼容。
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